【摘 要】
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目的 进行毛囊各主要生长细胞的体外分离、培养及生物学特性的观察.方法 对人头皮毛囊组织进行体外钝行分离、组织块法及酶消化来获得毛囊外根鞘细胞(ORSC)、毛乳头细胞(DPC)
【机 构】
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昆明医学院第一附属医院皮肤性病科,云南,昆明,650032川北医学院附属医院皮肤性病科,四川,南充,637000;昆明医学院第一附属医院皮肤性病科,云南,昆明,650032;
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目的 进行毛囊各主要生长细胞的体外分离、培养及生物学特性的观察.方法 对人头皮毛囊组织进行体外钝行分离、组织块法及酶消化来获得毛囊外根鞘细胞(ORSC)、毛乳头细胞(DPC)、毛囊真皮鞘细胞(DSC),利用不同的体外培养条件分别对这三种细胞进行体外增殖培养,利用倒置显微镜及免疫组化的方法对细胞来源和生长特性进行观察.结果 组织块法培养的上、下段毛囊:上段毛囊来源的OHSC增殖生长速度较下段毛囊ORSC快;酶消化法分离得到的ORSC,利用K-SFM培养液进行培养,整体细胞生长呈典型的“铺路石”样结构.可传4代;酶消化法分离得到的DSC,利用10%～15%低糖培养液进行培养,单个细胞生长状态呈长三角形,可传三代;经酶消化法,每3cm×3cm大小的头皮可以获得约500个完整毛乳头,利用10%～15%低糖培养液进行DPC培养,细胞由毛乳头边缘向四周呈放射状生长,成功传代8代,四代内的细胞“聚集性”生长状态明显.免疫组化细胞鉴定:ORSC CK19免疫组化染色呈阳性;DPC浆抗波形丝蛋白呈阳性显色;DSC胞浆内高表达波形丝蛋白.结论 组织块法证明毛囊上段细胞生长情况更为活跃,再次验证毛囊干细胞可能存在于毛囊上段“隆突部”的假说;经钝行分离和酶消化法结合的方法来进行人头皮毛囊相关细胞的分离和培养,所获得三种细胞的细胞活性、生长增殖情况均较好,细胞鉴定证实细胞来源的可靠性.
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