【摘 要】
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目的 探究黄连素对乏氧环境中鼻咽癌细胞系CNE-2及裸鼠移植瘤的增敏效应及其分子机制。方法四甲基偶氮唑盐比色法（ MTT法）检测黄连素对CNE-2细胞的增殖抑制作用，克隆形成实验观察5μmol/L黄连素对常氧和乏氧环境中CNE-2细胞放射敏感性的影响。黄连素乏氧下作用24 h后给予8 Gy X射线照射，流式细胞技术检测CNE-2细胞凋亡率。建立鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型，观察黄连素及单次8
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院放射治疗科,210029,南京医科大学第一附属医院放射治疗科,210029,南京医科大学第一附属医院放射治疗科,210029,南京医科大学第一附属医院放射治疗科,210029,
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目的 探究黄连素对乏氧环境中鼻咽癌细胞系CNE-2及裸鼠移植瘤的增敏效应及其分子机制。方法四甲基偶氮唑盐比色法（ MTT法）检测黄连素对CNE-2细胞的增殖抑制作用，克隆形成实验观察5μmol/L黄连素对常氧和乏氧环境中CNE-2细胞放射敏感性的影响。黄连素乏氧下作用24 h后给予8 Gy X射线照射，流式细胞技术检测CNE-2细胞凋亡率。建立鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型，观察黄连素及单次8 Gy照射对移植瘤的抑制作用。 Western blot检测乏氧条件下黄连素对HIF-1α及VEGF蛋白表达的抑制作用。结果黄连素显著抑制CNE-2细胞增殖，且存在时间、浓度依赖效应，24 h药物作用后半数抑制剂量IC50为（14.9±2.2）μmol/L。乏氧环境下，5μmol/L黄连素处理后的克隆形成率较单纯乏氧组下降，其增敏比（ SERD0）为1.27。在常氧环境中克隆形成率较乏氧组显著增加，常氧组和常氧加药组的SERD0分别为1.45和1.74。5和15μmol/L黄连素能在乏氧环境中单独发挥促凋亡作用，与对照组比较差异有统计学意义（ t＝5.01、9.02，P＜0.05），黄连素联合照射后，凋亡率较单纯照射组增加（t＝5.31、9.91，P＜0.05）。体内实验显示，照射给药组肿瘤体积的增长显著延迟于对照组及单纯给药组，肿瘤倍增时间联合组较单纯照射组及对照组差异有统计学意义（t＝2.96、14.52，P＜0.05）。 Western blot显示乏氧条件下HIF-1α、VEGF表达升高，黄连素作用24 h后表达显著下调。结论黄连素对乏氧环境中的CNE-2细胞及裸鼠移植瘤有放射增敏作用，其与下调乏氧环境中HIF-1α及下游因子VEGF的表达有关。
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