观察严重烫伤大鼠早期胰岛素分泌功能变化情况并探讨其信号转导机制。
方法将24只7周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为单纯假伤组、假伤＋BPV(HOpic)组、单纯烫伤组和烫伤＋BPV(HOpic)组，每组6只。单纯烫伤组、烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠在94 ℃热水中浸浴腹部6 s、背部12 s，造成50%体表总面积Ⅲ度烫伤；单纯假伤组、假伤＋BPV(HOpic)组大鼠在37 ℃温水中浸浴腹部6 s、背部12 s，模拟致伤。伤后0(即刻)～2 d，烫伤＋BPV(HOpic)组、假伤＋BPV(HOpic)组大鼠每天一次性腹腔注射0.5 mg/mL磷脂酰肌醇3－激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路增强剂BPV(HOpic)溶液0.6 mg/kg，单纯烫伤组、单纯假伤组大鼠每天一次性腹腔注射等体积二甲基亚砜。伤后72 h，剪尾法取大鼠尾血，用血糖仪测定空腹血糖；取大鼠胰腺组织，苏木精－伊红染色观察胰岛组织病理学表现，透射电镜观察胰岛β细胞超微结构以计数每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒并计算胰岛素空泡占比，蛋白质印迹法检测胰腺PI3K/Akt信号通路中Akt磷酸化水平。对数据行单因素方差分析和LSD检验。
结果(1)伤后72 h，单纯假伤组与假伤＋BPV(HOpic)组大鼠空腹血糖水平均正常且相近(P>0.05)，与该2组比较，单纯烫伤组大鼠空腹血糖水平显著升高(P<0.01)，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠空腹血糖水平没有明显变化(P>0.05)。与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠空腹血糖水平显著降低(P<0.01)。(2)伤后72 h，单纯假伤组与假伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛形态完整且胰岛细胞排列整齐，与该2组比较，单纯烫伤组大鼠胰岛形态不完整，胰岛内空泡样变多见，细胞排列不规则，部分胰岛β细胞胞质淡染或透亮；烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛形态变化不明显。与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛形状较为完整，胰岛内空泡样变较少，细胞排列较规则，胰岛β细胞胞质淡染或透亮较少。(3)伤后72 h，单纯假伤组与假伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数和胰岛素空泡占比均相近(P>0.05)，与该2组比较，单纯烫伤组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数显著减少(P<0.01)，胰岛素空泡占比显著增加(P<0.01)；烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数明显减少(P<0.05)，胰岛素空泡占比没有明显变化(P>0.05)。与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数显著增多(P<0.01)，胰岛素空泡占比显著减少(P<0.01)。(4)伤后72 h，单纯假伤组、假伤＋BPV(HOpic)组、单纯烫伤组、烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平分别为0.91±0.03、0.98±0.03、0.78±0.08、0.87±0.08。与单纯假伤组比较，假伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平明显升高(P<0.05)，单纯烫伤组大鼠胰腺Akt磷酸化水平显著降低(P<0.01)，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平无明显变化(P>0.05)；与假伤＋BPV(HOpic)组比较，单纯烫伤组与烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平均显著降低(P<0.01)；与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平明显升高(P<0.05)。
结论严重烫伤大鼠早期胰腺PI3K/Akt信号通路活性降低，胰岛素分泌功能下降；提高胰腺PI3K/Akt信号通路活性可以改善早期胰岛素分泌功能，恢复血糖生理水平。