脂肪干细胞联合几丁糖对兔扩张皮肤组织即时回缩率的影响

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目的 探讨脂肪干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)联合几丁糖对兔扩张皮肤组织即时回缩率的影响.方法 取新西兰大白兔腹股沟脂肪,利用酶消化法体外分离培养ADSCs并传代.取第3代细胞鉴别其表面特异性标记物;行成软骨及成表皮诱导,鉴定其多向分化能力.取40只2~3月龄新西兰大白兔,随机分为4组(n=10),分别为空白对照组(A组)、ADSCs组(B组)、几丁糖组(C组)、ADSCs+几丁糖组(D组).各组均建立背部皮肤扩张模型;扩张器埋置前,C、D组于扩张器表面涂抹5 mL 2%医用几丁糖,B、D组在埋置部位皮下多点注射1 mL浓度为5×106个/mL的第3代ADSCs细胞悬液.埋置后常规注射扩张,4周后达预期容量.原位维持1周后,取材测量扩张皮肤组织即时回缩率,HE染色测量皮肤全层和表皮以及纤维包膜厚度,Masson染色观察纤维包膜中胶原纤维情况,CD31免疫组织化学染色检测皮肤组织中微血管形成情况,并计算微血管密度(microvessel density,MVD).结果 细胞鉴定示分离培养细胞为ADSCs,且具有多向分化能力.各组动物均存活至实验完成.D组扩张皮肤组织即时回缩率显著小于其他组,B、C组小于A组,B组小于C组,比较差异均有统计学意义(P<0.05).组织学染色示A、B组成熟期成纤维细胞较多,胶原纤维粗大且排列规则;而C、D组幼稚期成纤维细胞较多,胶原纤维纤细且稀疏.B、D组皮肤全层及表皮厚度、MVD均显著高于A、C组,C、D组纤维包膜厚度显著低于A、B组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);其余组间以上指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 ADSCs移植可促进兔扩张皮肤组织再生以及血管新生,但对于纤维包膜无显著影响,而几丁糖可抑制纤维包膜的生成,两者联合应用对于抑制扩张皮肤组织的即时回缩具有协同作用.
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