【摘 要】
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目的 建立溺死尸体脏器气单胞菌气溶素(aerA)和溶血素(hlyA)两基因的PCR-CE检测方法,验证该方法的特异性和灵敏度,并探讨其在溺死诊断中的应用价值.方法 设计气单胞菌(Aeromo
【机 构】
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广州市刑事科学技术研究所,公安部法医病理学重点实验室,广州 510442;南方医科大学法医学院,广州 510515;广东工业大学轻工化工学院,广州 510006;重庆医科大学基础医学院,重庆 4000
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目的 建立溺死尸体脏器气单胞菌气溶素(aerA)和溶血素(hlyA)两基因的PCR-CE检测方法,验证该方法的特异性和灵敏度,并探讨其在溺死诊断中的应用价值.方法 设计气单胞菌(Aeromonas)特异性引物aer-A1和hlyA-1,构建PCR-CE方法;扩增52种标准株DNA;确定最低DNA检测浓度;检测16只实验猪和40例真实案件尸体组织样本,分别计算两对引物总阳性率.结果 引物aerA-1可特异性扩增杀鲑气单胞菌和温和气单胞菌,产物片段为180bp,灵敏度分别为0.034、0.92ng;引物hlyA-1可特异性扩增杀鲑气单胞菌和嗜水气单胞菌,产物片段为150bp,灵敏度分别为0.94、0.034ng.利用aerA-1检测溺死实验猪和真实案件尸体组织样本,溺死阳性率分别为70.00％、78.38％;利用hlyA-1检测溺死实验猪和真实案件尸体组织样本,溺死阳性率分别为80.00％、83.78％.结论 基于气单胞菌aerA基因和hlyA基因建立的PCR-CE检测方法进行溺死诊断,快速灵敏,特异性好,有良好的应用前景.
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