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目的:构建人细胞周期素依赖蛋白激酶2(CDK2)基因RNA干扰慢病毒载体。方法:利用lnvitrogen公司在线软件设计人CDK2(NM001798)shRNA序列,退火形成dsoligo后克隆到pENTR^TM/U6载体的黏性末端,测序,再与慢病毒载体重组,测序鉴定,在脂质体的介导下将慢病毒的包装混合物和CDK2基因重组慢病毒载体转染293FT细胞,包装成病毒后,收集细胞培养上清液,测定病毒滴度。结果:测序证实pENTR^TM/U6-CDK2-shRNA为阳性克隆,与慢病毒载体重组后测序结果显示也为阳性