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目的:研究建立蟾酥HPLC指纹图谱分析方法,为其质量控制和药材鉴别提供依据。方法:利用高效液相色谱法,采用反相Alltima C18柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:0.5%磷酸二氢钾溶液(磷酸调节pH为3.0)和乙腈(梯度洗脱);检测波长:296 nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min。结果:在选定的色谱条件下确定10个峰构成蟾酥药材的指纹特征,各批次药材均具有上述特征,但特征峰的相对含量分布差异导致色谱概貌存在一定差异。确定了蟾酥HPLC中酯蟾毒配基(Resibufogenin)、华蟾酥毒基(Cinobufagin)、蟾毒灵(Bufain)、去乙酰基蟾毒它灵(Bufotalin)以及华蟾毒精(Cinobufotalin)所对应的保留时间一致;10个批次指纹图谱相似度均大于0.93。结论:该方法准确、简单、稳定,其色谱指纹图谱可用于蟾酥的鉴别和质量控制。