【摘 要】
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目的鉴定结核分枝杆菌早期分泌靶向抗原6（ESAT-6）样蛋白esxN特异性HLA-A*0201限制性细胞毒性T细胞（CTL）表位并用于肺结核诊断。方法采用SYFPEITHI软件预测esxN中受HLA-A*0201限制
【基金项目】
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国家自然科学基金(81501363);浙江省自然科学基金(LY17C010004);温州市科技计划项目(Y20150093)
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目的鉴定结核分枝杆菌早期分泌靶向抗原6（ESAT-6）样蛋白esxN特异性HLA-A*0201限制性细胞毒性T细胞（CTL）表位并用于肺结核诊断。方法采用SYFPEITHI软件预测esxN中受HLA-A*0201限制性的CTL表位并合成候选表位;采用主要组织相容性复合体（MHC）-肽复合物稳定性实验检测候选表位与HLA-A*0201分子结合力;采用酶联免疫斑点实验（ELISPOT）研究候选表位在HLA-A*0201转基因小鼠中的免疫原性;基于鉴定的CTL表位、ESAT-6和培养滤液蛋白10（CFP-10）,采用ELISPOT检测肺结核患者体内表位及蛋白特异性CTL的水平。结果 6条候选CTL表位中,esxN15-24（AMIRAQAASL）和esxN48-57（VACQEFITQL）与HLA-A*0201分子有较高结合力;候选表位免疫HLA-A*0201转基因小鼠,esxN48-57诱导产生可分泌γ干扰素（IFN-γ）的T细胞反应;在HLA-A*0201阳性肺结核患者中检测到esxN15-24、esxN48-57、ESAT-6、CFP-10特异性分泌IFN-γ的T细胞;esxN15-24、esxN48-57诊断肺结核的敏感率与ESAT-6、CFP-10相近。结论从结核分枝杆菌esxN中鉴定出两条HLA-A*0201限制性CTL表位,其有望用于辅助肺结核病的诊断。
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