【摘 要】
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为成功表达PRRSV GZJL株GP5蛋白,本研究设计合成一对引物,并以PCR方法从阳性重组质粒pMD18-T-GP5中扩增得到PRRSV GZJL株GP5基因片段中的79-600 bp即dGP5。将dGP5基因连接至
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州省动物疾控中心,贵州省动物疫病研究所
【基金项目】
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贵州省农业攻关项目[黔科合NY字(2009)3071号], 国家科技部支撑计划项目(2007BAD53B03), 贵州省科技厅重大专项子项目(20086011), 贵阳市农业局科技计划项目([2008]动防-03号), 贵州省农业委员会科技计划项目编号(2009-09)
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为成功表达PRRSV GZJL株GP5蛋白,本研究设计合成一对引物,并以PCR方法从阳性重组质粒pMD18-T-GP5中扩增得到PRRSV GZJL株GP5基因片段中的79-600 bp即dGP5。将dGP5基因连接至原核表达载体pET-32a(+),并转化入表达菌株BL21(DE3)。经PCR、双酶切和测序鉴定,阳性菌株进行IPTG诱导表达,纯化的融合蛋白His-dGP5应用SDS-PAGE和Western-blotting方法进行分析,结果表明,本研究成功构建了原核表达菌株,其所表达的融合蛋白His-
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