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目的
探讨自噬在脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用。
方法雄性C57BL/6小鼠36只,6周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=12):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)和脓毒症+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(CLP+3-MA组)。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。CLP+3-MA组术后1 h时腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg。术后24 h时取颈动脉血样,行血气分析,计算氧合指数;取肺组织,行肺组织病理学评分,测定肺组织湿重/干重比值(W/D比值),采用比色法测髄过氧化酶(MPO)活性,采用Western blot法测定自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型(LC3Ⅱ)、Beclin-1和溶酶体相关蛋白Rab7和LAMP2的表达,进行支气管肺泡灌洗,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)总细胞和多形核中性粒细胞(PMN)。
结果与S组比较,CLP组和CLP +3-MA组肺组织病理学评分、W/D比值、MPO活性、BALF总细胞计数和PMN计数升高,氧合指数降低,CLP组肺组织LC3Ⅱ、Beclin-1、LAMP2和Rab7的表达上调(P<0.05)。与CLP组比较,CLP+3-MA组肺组织病理学评分、W/D比值、MPO活性、BALF总细胞计数和PMN计数升高,氧合指数降低,肺组织LC3Ⅱ、Beclin-1、LAMP2和Rab7的表达下调(P<0.05)。
结论自噬参与了脓毒症小鼠急性肺损伤时的内源性保护机制。