【摘 要】
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目的通过体外实验探讨钙调素(regucalcin)拮抗剂抑制MDA-MB-231人乳腺癌细胞骨转移和增殖活动的作用。方法体外培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞,取对数生长期的细胞,分为对
【机 构】
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四川省医学科学院四川省人民医院城东病区肿瘤科; 四川省医学科学院四川省人民医院城东病区创伤外科;
【基金项目】
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四川省卫生和计划生育委员会科研课题(140082)~~
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目的通过体外实验探讨钙调素(regucalcin)拮抗剂抑制MDA-MB-231人乳腺癌细胞骨转移和增殖活动的作用。方法体外培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞,取对数生长期的细胞,分为对照组、实验1组、实验2组[分别以fenbieyi regucalcin拮抗剂O-(4-乙氧基)-丁基-小檗胺(EBB) 10μmol/L、1μmol/L进行处理]。采用MTT法检测肿瘤细胞增殖抑制作用; Transwell细胞侵袭实验、细胞划痕实验检测肿瘤细胞侵袭,转移情况;流式细胞仪测定细胞周期;免疫印迹法测定骨转移相关蛋白(P38、JNK、AKT)表达情况。结果 MTT检测显示EBB能够抑制MDA-MB-231细胞的生长,且当剂量增加时这种抑制作用更加显著,MDA-MB-231细胞的半数抑制浓度(IC50)为(13. 22±2. 10)μmol/L。实验1组与实验2组的细胞划痕愈合率为(67. 03±3. 63)%和(72. 01±5. 20)%,明显少于空白对照组的(92. 22±5. 39)%(P <0. 01)。与对照组比较,不同浓度的EBB均能有效抑制MDA-MB-231细胞的转移(P <0. 01),其中实验1组的抑制效果明显优于实验2组(P <0. 01)。实验1组与实验2组的的S期比例明显高于对照组(P <0. 01),G2/M与GO/G1期比例明显低于对照组(P <0. 05),实验1组与实验2组之间比较无统计学差异(P> 0. 05)。实验1组与实验2组的JNK、AKT蛋白相对表达量明显低于对照组(P <0. 05,P <0. 01),三组P38蛋白相对表达量比较无统计学差异(P> 0. 05)。结论钙调素拮抗剂EBB能明显抑制MDA-MB-231人乳腺癌细胞骨转移和增殖活动,调节细胞周期,也能抑制成骨相关蛋白的表达。
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