【摘 要】
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目的 应用改良分子信标探针建立多重实时荧光PCR方法快速检测产毒性大肠杆菌.方法 通过美国国立生物技术信息中心(NCBI)下载产毒性大肠杆菌肠毒素基因Stp、Sth、Lt的基因序列
【机 构】
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深圳市龙岗区布吉预防保健所检验科,广东深圳,518112
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目的 应用改良分子信标探针建立多重实时荧光PCR方法快速检测产毒性大肠杆菌.方法 通过美国国立生物技术信息中心(NCBI)下载产毒性大肠杆菌肠毒素基因Stp、Sth、Lt的基因序列,设计引物和探针,建立多重实时荧光PCR体系,应用于感染性腹泻病原体中ETEC的快速筛查.结果 改良分子信标多重荧光PCR反应体系,1管内同时检测ETEC的Stp、Sth、Lt三个毒素基因的方法具有简单、快速、省时、灵敏度高的特点,从核酸提取到检测结果仅需3h,最低检出限可达3× 102 CFU/mL,稳定性良好,且无交叉反应,与普通PCR相比,灵敏度和特异度分别为100％和99.92％,kappa值为0.87,一致性良好.结论 本研究建立了一种用于检测产毒性大肠杆菌的方法,具有简便、快速和高效的特点,适合用于ETEC的临床诊断.
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