【摘 要】
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应用ＲＴ－ＰＣＲ获取新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ８株的部分囊膜糖蛋白基因片段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析，长为９２６ｂｐ，与预期结果相符；将该基因片段定向克隆入质粒载体ｐＵＣ１９中，得到重组质粒ｐ９２６，酶切分析结果与已发表的ＮＤＶ毒
【基金项目】
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江苏省自然科学基金,教委自然科学基金
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应用ＲＴ－ＰＣＲ获取新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ８株的部分囊膜糖蛋白基因片段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析，长为９２６ｂｐ，与预期结果相符；将该基因片段定向克隆入质粒载体ｐＵＣ１９中，得到重组质粒ｐ９２６，酶切分析结果与已发表的ＮＤＶ毒株酶切位点一致。随后将该基因片段标记成为地高辛探针，该探针能检测出三株ＮＤＶ（Ｆ４８Ｅ８株、ＬａＳｏｔａ株、Ｕｌｓｔｅｒ株）基因组ＲＮＡ，不能检测出ＩＢＤＶ和ＩＢＶ基因组ＲＮＡ，表明其特异性良好。应用该探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交试验鉴定ＮＤＶＦ４８Ｅ８株的Ｆ和ＨＮ基因克隆，结果质粒ｐＦ内１．７ｋｂ片段和质粒ｐＨＮ内１．９３ｋｂ片段为阳性，从而进一步证实ＮＤＶＦ４８Ｅ８株的囊膜糖蛋白基因均已成功克隆。
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