稳定表达人细胞色素P450 1A2的HepG2细胞的建立及其代谢效应

来源 :浙江大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:donghao3000
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目的:建立稳定表达人细胞的色素P450 1A2(CYP1A2)的HepG2细胞.方法:将所克隆的野生型CYP1A2 cDNA从重组质粒pGEM-CYP1A2中用Kpn Ⅰ/BamH Ⅰ双酶切,并亚克隆到哺乳动物细胞表达载体pREP9中.再将重组质粒转化感受态大肠杆菌Top10,用氨苄青霉素抗性筛选和限制酶谱鉴定.改良的磷酸钙介导的细胞转染法将重组质粒pREP9-CYP1A2转染肝癌细胞HepG2,用RT-PCR技术对转基因细胞的CYP1A2 mRNA表达作了分析,并用MTT法比较转基因细胞对黄曲霉素B1(
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