膀胱癌T24细胞顺铂与吉西他滨多药耐药细胞株的建立及其生物学特征

• 作 者: 王鹏 陈明坤 陈子坚 郭晓彬 杨诚 卞军 周其赵 郭文彬 薛康颐 张万松 杨建昆 刘存东
• 机 构: 510630 广州，南方医科大学第三附属医院泌尿外科,510630 广州，南方医科大学第三附属医院泌尿外科,510630 广州，南方医科大学第三附属医院泌尿外科,510630 广州，南方医科大学第三附
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2018年35期
• 关键词: 膀胱癌 化疗 顺铂 吉西他滨 多药耐药

目的

采用浓度梯度法诱导建立顺铂(DDP)及吉西他滨(GEM)多药耐药膀胱癌细胞株(T24/DDP&GEM)，并分析其生物学特征。

方法

利用人膀胱癌细胞株T24，采用DDP和GEM作为诱导剂在体外建立DDP及GEM多药耐药的人膀胱癌细胞模型T24/DDP&GEM。通过倒置相差显微镜下观察T24、T24/DDP&GEM细胞形态差异，细胞计数试剂盒(CCK-8)方法检测相关细胞的耐药性，生长曲线检测相关膀胱癌细胞的增殖能力，Western blot检测P-糖蛋白(P-gP)的表达。

结果

经过DDP和GEM 12个月的交替的诱导，成功建立了T24/DDP&GEM。倒置相差显微镜下观察并与T24细胞比较，T24DDP/GEM形态不规则，体积变大，细胞内可见空泡和颗粒形成。T24/DDP&GEM的增殖能力与T24比较显著下降，T24/DDP&GEM的倍增时间为(39.51±0.36) h，T24的倍增时间为(28.06±0.76) h，倍增时间延长(11.45±0.41) h。T24/DDP&GEM的耐药性明显提高，其耐药指数对于DDP为4.25，对于GEM为62.97。与T24细胞比较，T24/DDP&GEM细胞的S和G₂期的细胞比例显著减少，而G₁期细胞比例显著增多，细胞周期减慢。Western blot结果显示，T24/DDP&GEM细胞中P-gp的表达水平明显高于T24。

结论

人工诱导的DDP及GEM耐药膀胱癌细胞株T24/DDP&GEM具有多药耐药肿瘤细胞特征。