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目的
观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)脑室内移植联合银杏内酯K(GK)腹腔注射对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用。
方法体外培养BMSCs并诱导向神经细胞样分化。制备大鼠大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注(MCAO)模型。实验动物按事后机率均等单盲随机分为5组,分别设为Sham组,生理盐水腹腔注射组、GK腹腔注射组、BMSCs移植+生理盐水腹腔注射组、BMSCs移植+GK腹腔注射组。于脑缺血再灌注后1 h腹腔给药,于24 h后移植BMSCs,于72、120、168 h进行神经功能测定;然后分别处死动物,取脑染色,观察脑梗死面积,测定脑损伤程度,脑水肿程度等。蛋白质印迹法(Western blot)检测各组脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白含量,以评价GK是否通过增加脑组织中VEGF的含量从而提高脑缺血灶处血管再生。
结果GK可以明显增加大鼠脑缺血脑组织内VEGF的蛋白含量。BMSCs脑室内移植联合GK腹腔注射组中大鼠脑缺血区细胞凋亡数[(18.8±3.6)个/高倍镜视野,F=167.531,P<0.01]、脑梗死体积[(17.31±5.24)%,F=34.910,P<0.01]及脑含水量[(73.55±0.53)%,F=65.128,P<0.01]较其他各组明显降低,治疗后大鼠神经缺陷症状评分[120 h:(3.51±0.46)分,F=15.473,P<0.01;168 h:(2.03±0.35)分,F=21.711,P<0.01]较对照组下降明显。
结论BMSCs脑室内移植联合GK腹腔注射对大鼠脑缺血再灌注损伤有明显协同神经保护作用。GK的作用是通过增加脑缺血灶VEGF的含量来实现的。