【摘 要】
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目的研究miR-96靶向调控NF-κB/miR-155/FOXO3a信号通路对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法经慢病毒转染沉默肝癌HepG2细胞miR-96蛋白表达,通过WST-8实验测定细胞的生长
【基金项目】
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湖北省自然科学基金项目(编号:2016CFB575)
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目的研究miR-96靶向调控NF-κB/miR-155/FOXO3a信号通路对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法经慢病毒转染沉默肝癌HepG2细胞miR-96蛋白表达,通过WST-8实验测定细胞的生长曲线,流式细胞术检测基因沉默后HeGp2的凋亡情况,Western blot分析沉默miR-96表达对肝癌细胞FOXO3a、miR-155、IKB、NF-kB、Ki67、PCNA、VEGF、Bcl-2、Bad、cleaved-caspase-3蛋白表达的影响。结果慢病毒转染后可获得遗传稳定的HepG2-miR-96-shRNA细胞系,WST-8细胞生长结果显示:与对照组比较,HepG2-miR-96-shRNA细胞的增殖能力显著降低(P <0.05);流式细胞术检测发现:HepG2-miR-96-shRNA细胞凋亡数量明显提升(P<0.05);Western blot结果提示:沉默miR-96蛋白表达后,促凋亡蛋白Bad,cleaved-caspase-3、FOXO3a及NF-κB蛋白的表达量显著增加,抑凋亡蛋白Bcl-2、miR-155、IkB及VEGF表达量明显降低。结论 miR-96通过靶向调控NF-κB/miR-155/FOXO3a信号通路抑制肝癌HepG2细胞凋亡,促进细胞增殖。
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