叶酸耦联白蛋白Cypate纳米粒的构建及体外膀胱癌靶向光热杀伤效应的研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanya_33
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目的 构建一种新型光热纳米材料——叶酸耦联白蛋白Cypate (FA-BSA-Cypate)纳米粒,探讨其介导的靶向光热疗法对人膀胱癌5637细胞的体外杀伤效应及抗肿瘤机制.方法 透析法制备FA-BSA-Cypate纳米粒并进行电镜表征观察;观察不同浓度FA-BSA-Cypate纳米粒溶液(1、10、100 μg/ml)在808 nm激光(1.5 W/cm2)照射下温度随时间变化;噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度FA-BSA-Cypate纳米粒(0、25、50、100、250、500 μg/ml)对人膀胱癌5637细胞的毒性大小以及不同浓度FA-BSA-Cypate纳米粒(0、25、50、100、250、500 μg/ml)在808 nm激光(1.5 W/cm2,5 min)照射下对人膀胱癌5637细胞的靶向光热杀伤效应;将细胞分为4组:空白对照组、激光组、BSA-Cypate+激光组、FA-BSA-Cypate+激光组,采用Western blot法检测各组B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、生存素(Survivin)表达水平.结果 成功制备了具有良好的光热特性的FA-BSA-Cypate纳米粒,粒径为(95.0±8.7) nm;808 nm激光(1.5 W/cm2,5 min)照射下,纳米粒溶液最高温度可达59 ℃,且具有浓度依赖性;不同浓度的FA-BSA-Cypate纳米粒作用于5637细胞24h后细胞存活率在95%以上,无明显生物毒性;在联合808 nm激光照射下(1.5 W/cm2,5 min),含不同浓度FA-BSA-Cypate纳米粒(0、25、50、100、250、500μg/ml)的细胞存活率分别为(98.60±5.25)%、(87.85±4.37)%、(80.72±3.61)%、(69.43±4.28)%、(59.28 ±4.51)%和(51.15±3.79)%,细胞存活率随着纳米粒浓度增加而下降,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,FA-BSA-Cypate+激光组及BSA-Cypate+激光组bax、Caspase-3蛋白表达水平显著增高,而bcl-2、Survivin蛋白表达水平明显降低.结论 FA-BSA-Cypate纳米粒介导的靶向光热疗法对人膀胱癌5637细胞具有良好的杀伤效果,能有效抑制5637细胞的增殖并促进其凋亡.
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