【摘 要】
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目的 建立水、贝类、血液及唾液中甲型肝炎病毒核酸RT-PCR检测方法.方法 加入一定量甲肝病毒到贝类、水、血液及唾液标本中,贝类经研磨后,PEG沉淀浓缩;水直接经PEG沉淀浓缩;
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所, 北京,100052卫生部北京医院;
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目的 建立水、贝类、血液及唾液中甲型肝炎病毒核酸RT-PCR检测方法.方法 加入一定量甲肝病毒到贝类、水、血液及唾液标本中,贝类经研磨后,PEG沉淀浓缩;水直接经PEG沉淀浓缩;以上标本及血液、唾液标本用Trizol试剂提取核酸,套式RT-PCR检测甲肝病毒核酸.引物位于甲肝病毒结构区VP1-2A区.结果病毒培养液中能检测到0.1 TCID50甲肝病毒;水、血清及唾液中能检测到1TCID50甲肝病毒;毛蚶中能检测到1-10TCID50甲肝病毒.某地甲肝病毒污染的水及患者血清标本中检测到了甲肝病毒核酸,并进行了序列分析比对.结论 本研究建立的不同标本中甲型肝炎病毒核酸RT-PCR检测方法,敏感、特异、快速,具有广泛的应用价值,将为甲肝的溯源研究及分子流行病学研究打下理论基础及提供技术支撑.
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