【摘 要】
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目的 探讨结直肠癌小鼠结直肠中的韦荣氏球菌Veillonellaparvula对结直肠癌细胞的影响. 方法 AOM/DSS诱导C57BL/6小鼠形成结直肠癌后,收集结直肠内容物并涂布于LB平板进行培
【机 构】
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邢台医学高等专科学校,河北邢台054000
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目的 探讨结直肠癌小鼠结直肠中的韦荣氏球菌Veillonellaparvula对结直肠癌细胞的影响. 方法 AOM/DSS诱导C57BL/6小鼠形成结直肠癌后,收集结直肠内容物并涂布于LB平板进行培养.挑取平板上的单克隆菌落进行摇菌培养,取韦荣氏球菌Veillonellaparvula菌液上清处理结直肠癌细胞HT-29,微量滴定板法检测其活力;质谱分析上清中的蛋白质并进行纯化.用纯化的蛋白处理结直肠癌细胞HT-29,检测其活力和相关通路. 结果 取结直肠癌小鼠结直肠中的韦荣氏球菌Veillonellaparvula培养上清处理HT-29细胞,细胞活力显著增强(P＜0.05).收集Veil-lonellaparvula培养上清作质谱分析,评分大于150的分泌蛋白有12个,分别是RIW09983.1、EQC65645.1、WP_004692917.1、SNU97803.1、EQC64312.1、SNU98422.1、PKZ92195.1、EQC65720.1、WP_174892117.1、WP_060919644.1、KXB83763.1和EQC67766.1.将上述蛋白纯化后以10 μg/ml的浓度处理结直肠癌细胞HT-29后,其中EQC65720.1能够显著增强结直肠癌细胞HT-29的活力(P＜0.05).同时,将EQC65720.1 (GroEL)以10 μg/ml的浓度处理结直肠癌细胞SW620、COLO 205、HCT 116、LoVo、RKO、SW480、CT26.WT和LS513,细胞活力均显著增强(P＜0.05).用10 μg/ml GroEL处理结直肠癌细胞HT-29,JNK、ERK、p-JNK、p-ERK和AKT的表达水平无显著变化(P＞0.05),p-AKT的表达水平显著增强(P＜0.05).加入PI3K/AKT通路抑制剂LY294002后再用GroEL和LY294002同时处理,结直肠癌细胞HT-29的活力无显著变化(P＞0.05). 结论 韦荣氏球菌通过分泌GroEL蛋白激活结直肠癌细胞PI3K/AKT通路,并能促进结直肠癌细胞的活力.
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