自身启动子调控miR-7真核表达载体的构建及其意义

• 作 者: 郭萌萌 廖珍媛 赵娟娟 陶弋婧 胡燕 陈超 秦娜琳 郑静 徐
• 机 构: 遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地
• 出 处: 遵义医学院学报
• 发表日期: 2015年3期
• 关键词: miR-7 真核表达 肺癌 95D细胞 增殖 迁移 凋亡 miR-7 eukaryotic expression lung cancer 95D cell
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（NO：31370918）, 教育部新世纪优秀人才计划资助项目（NO：NCET-12-0661）, 贵州省国际合作项目（NO：10C315）

目的构建带有miR-7自身启动子的miR-7重组真核表达载体,研究其对人肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法预测miR-7启动子序列,设计含有该序列和miR-7前体序列目的片段的引物,PCR扩增后亚克隆入p GL3.0-Basic载体以构建miR-7自身启动子调控的真核表达载体p GL3.0-Basic-miR-7-promoter（命名为p-miR-7-pro）;将所构建载体转染人肺癌95D细胞,Real-time PCR探针法检测95D细胞中miR-7的表达水平;MTT和克隆形成实验分别检测95D细胞