徐淮山羊多能性转录因子mRNA制备及在成纤维细胞中的表达

• 作 者: 邱峰龙 张亚妮 倪蓉 李伟 陈庭锋 韦光辉 李碧春
• 机 构: 扬州大学动物科学与技术学院
• 出 处: 中国农业科学
• 发表日期: 2014年7期
• 关键词: 徐淮山羊 多能性转录因子 体外转录 MRNA Xuhuai goat transcription factors in vitro transcript
• 基金项目: 科技部转基因生物新品种培育重大专项（2011ZX08008-003）、国家高技术研究发展计划（2011AA100307-04）、江苏高校优势学科建设工程资助项目

【目的】克隆徐淮山羊多能性转录因子Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc的CDS片段，构建pMD19-T-oct4、pMD19-T-sox2、pMD19-T-klf4和pMD19-T-c-myc重组质粒，随后构建含T7启动子的pcDNA3-oct4、pcDNA3-sox2、pcDNA3-klf4和pcDNA3-c-myc重组质粒，通过体外转录，获得该4种多能性转录因子的mRNA，并使其在徐淮山羊成纤维细胞中稳定表达。【方法】应用RT-PCR方法分别从徐淮山羊睾丸组织、皮肤组织、小肠组织中扩增多能性转录因