【摘 要】
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目的建立小鼠原位左肺移植模型，探究抗CD3单抗缓解肺移植急性排斥损伤的作用机制，为其在临床肺移植的应用提供理论依据。方法选取SPF级野生型BALB/c和C57BL/6小鼠，构建原位左肺移植模型，设置同种同型对照组(C57BL/6→C57BL/6，6只)、同种异型对照组(BALB/c→C57BL/6，6只)，同种异型单抗处理组(BALB/c→C57BL/6，4只)。术后第2～6天及第9天每日腹腔注射
【机 构】
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首都医科大学基础医学院免疫学系，北京 100069,首都医科大学基础医学院免疫学系，北京 100069,首都医科大学基础医学院免疫学系，北京 100069,首都医科大学基础医学院免疫学系，北京 100
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目的建立小鼠原位左肺移植模型，探究抗CD3单抗缓解肺移植急性排斥损伤的作用机制，为其在临床肺移植的应用提供理论依据。
方法选取SPF级野生型BALB/c和C57BL/6小鼠，构建原位左肺移植模型，设置同种同型对照组(C57BL/6→C57BL/6，6只)、同种异型对照组(BALB/c→C57BL/6，6只)，同种异型单抗处理组(BALB/c→C57BL/6，4只)。术后第2～6天及第9天每日腹腔注射50 g抗CD3单抗。采用苏木精-伊红、马松染色以及CD3/髓过氧化物酶(MPO)免疫组化染色，观察各组移植肺T淋巴细胞和中性粒细胞浸润分布情况，进行急性排斥病理评分；实时荧光定量RT-PCR检测移植肺组织转录因子FoxP3和细胞因子IL-17A、IFN-γ的mRNA表达水平；流式细胞术检测受体小鼠脾脏中FoxP3＋调节性T细胞(Treg)占CD4＋ T细胞的比例。
结果移植术后10天，同种同型组移植肺外观呈淡红色，柔软有弹性，病理学检测未见明显的炎症细胞浸润和组织损伤；同种异型对照组移植肺外观呈绛紫色，硬度增加；同种异型单抗处理组外观淡红柔软，与同种异型对照组比较，淋巴细胞、中性粒细胞浸润显著减少，急性排斥损伤病理评分降低。实时荧光定量RT-PCR结果显示，与同种同型组相比，同种异型组移植肺中IL-17A和IFN-γmRNA的表达水平升高；抗CD3单抗可降低移植肺中IL-17A与IFN-γmRNA表达水平，升高FoxP3mRNA表达水平。流式细胞术结果显示，与同种同型、同种异型对照组相比，单抗处理组小鼠脾脏中Treg占CD4＋ T细胞的比例显著升高。
结论抗CD3单抗可诱导CD4＋ FoxP3＋Treg的分化并缓解肺移植急性排斥损伤。
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