真鲷虹彩病毒辽宁株跨膜蛋白（ORF049L）基因的克隆及表达

• 作 者: 孙志鹏 徐祥 李强 叶仕根 李华
• 机 构: 大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室
• 出 处: 大连海洋大学学报
• 发表日期: 2013年2期
• 关键词: 虹彩病毒 跨膜蛋白 原核表达 iridovirus transmembrane protein prokaryotic expression

克隆了真鲷虹彩病毒辽宁株（RSIV-LN09）跨膜蛋白（ORF049L）基因，利用生物信息学方法，对该基因编码蛋白的跨膜区及B细胞抗原位点等特征进行了分析。随后将该序列连接至pET-28a表达载体中，成功构建了pET-28a-ORF049L原核表达质粒。将表达质粒转化至B121（DE3）菌株后，经IPTG诱导获得大量携带组氨酸标签的融合蛋白。该融合蛋白经变性后采用镍层析柱进行亲和纯化，纯化蛋白再经SDS-PAGE和Western blot分析，确认获得了相对分子质量约为17000的高纯度重组蛋白His-0