【摘 要】
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目的探讨RegⅣ基因对胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭、转移能力的影响。方法取对数生长期的PANC-1细胞,于孵育箱中培养至70%~80%融合,分别以Puro-P-RegⅣ-shRNA慢病毒载体(P-Reg
【机 构】
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安徽医科大学上海临床学院,上海市第十人民医院
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目的探讨RegⅣ基因对胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭、转移能力的影响。方法取对数生长期的PANC-1细胞,于孵育箱中培养至70%~80%融合,分别以Puro-P-RegⅣ-shRNA慢病毒载体(P-RegⅣ-shRNA组)以及Puro-shRNA慢病毒空载体(P-NC-shRNA组)感染细胞,并设立不感染组(PANC-1组)。48 h后,分别用qRTPCR法和Western blotting法检测各组RegⅣmRNA及蛋白的表达。通过CCK-8试验检测细胞增殖情况,利用划痕试验和Transwell小室侵袭试验分别检测细胞的转移和侵袭能力。将10只5周龄的雌性裸鼠随机分成P-RegⅣ-shRNA裸鼠组和P-NC-shRNA裸鼠组,每组5只。取对数生长期的P-RegⅣ-shRNA和P-NC-shRNA组细胞分别注射入上述两组中。自接种日起每天观察肿瘤结节生长情况,6周后处死裸鼠并取出瘤体称重并测量瘤体体积。结果P-RegⅣ-shRNA组中RegⅣmRNA和蛋白的表达水平较PANC-1组和P-NC-shRNA组均下降(P均<0.05)。P-RegⅣ-shRNA组细胞增殖活力较P-NC-shRNA组和PANC-1组下降(P均<0.05)。与PANC-1组、P-NC-shRNA组比较,P-RegⅣ-shRNA组48 h细胞迁移距离缩短,穿膜细胞数减少(P均<0.05)。PANC-1组、P-NC-shRNA组各观察指标比较,P均>0.05。与P-NC-shRNA裸鼠组比较,P-RegⅣ-shRNA裸鼠组肿瘤生长速度慢,肿瘤体积小(P均<0.01)。结论下调RegⅣ基因可抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖、转移、侵袭。
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