【摘 要】
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目的：建立快速检测甲型肝炎病毒（HAV）抗原含量的双抗体夹心ELISA方法，并进行验证及初步应用。方法：用HAV多克隆抗体和HAV单克隆抗体酶结合物建立双抗体夹心ELISA法，检测HAV抗原含量。对建立的方法进行特异性、线性（标准曲线）、准确度、精密度、灵敏度验证，对不同生产厂家生产的HAV疫苗（人二倍体细胞）与不同工艺阶段的HAV疫苗（人二倍体细胞）中间产品进行适用性检测。结果：HAV多克隆抗体
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目的：建立快速检测甲型肝炎病毒（HAV）抗原含量的双抗体夹心ELISA方法，并进行验证及初步应用。方法：用HAV多克隆抗体和HAV单克隆抗体酶结合物建立双抗体夹心ELISA法，检测HAV抗原含量。对建立的方法进行特异性、线性（标准曲线）、准确度、精密度、灵敏度验证，对不同生产厂家生产的HAV疫苗（人二倍体细胞）与不同工艺阶段的HAV疫苗（人二倍体细胞）中间产品进行适用性检测。结果：HAV多克隆抗体的最佳包被浓度为8μg/mL，酶标抗体最佳稀释度为1∶10 000，封闭剂为1%BSA。该方法与其他人用疫苗和辅料成分无交叉反应；线性范围0.546 875～17.500 000 IU/mL,R~2＞ 0.99；准确度验证回收率80.1%～123.7%；精密度验证变异系数＜8.3%。检测不同厂家的HAV疫苗（人二倍体细胞）和不同工艺阶段的HAV疫苗（人二倍体细胞）中间产品呈良好的剂量依赖效应。结论：建立了适用于HAV抗原含量检测的双抗体夹心ELISA方法，符合定量检测的需求，可用于不同毒株生产的HAV疫苗（人二倍体细胞）检测，可用于甲肝病毒收获液、浓缩液、纯化液、灭活液及原液等不同工艺阶段样品检测。
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