【摘 要】
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目的:利用免疫磁珠分离成人骨髓中STRO-1+阳性细胞,获得同质性骨髓基质干细胞。方法:实验于2004-06/2005-06在东南大学修复重建外科研究所实验室完成。采集正常自愿献髓者骨
【基金项目】
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江苏省高新技术研究项目资助(BG2001033);2003年东南大学医学研究基金面上项目(502-2003YJ25)~~
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目的:利用免疫磁珠分离成人骨髓中STRO-1+阳性细胞,获得同质性骨髓基质干细胞。方法:实验于2004-06/2005-06在东南大学修复重建外科研究所实验室完成。采集正常自愿献髓者骨髓,淋巴细胞分离液体离心纯化分离后利用免疫磁珠分离出STRO-1+细胞,研究其生长曲线、体外扩增能力、集落形成能力、细胞表型、细胞周期、成骨能力。结果:①利用免疫磁珠可从成人骨髓中获取STRO-1+细胞。经体外培养发现STRO-1+细胞贴壁生长,相差显微镜下STRO-1+细胞呈成纤维细胞梭形外观。②生长曲线可分为细胞生长延滞期、对数生长期及稳定期,细胞倍增时间为57h。③STRO-1+细胞可以在体外扩增12周左右,形成的成纤维细胞集落数、处于细胞分裂期的细胞数、扩增倍数均低于传统分离方法得到的骨髓基质干细胞。④经流式细胞仪检测,STRO-1+细胞稳定地表达CD29,CD44,CD105,不表达造血细胞系的表面标记CD14,CD34,CD45,HLA-DR。⑤经成骨培养发现STRO-1+的骨髓基质干细胞具有很强的成骨分化能力。结论:利用免疫磁珠能够从成人骨髓中快速分离、纯化骨髓基质干细胞,且具有高效、灵敏、对骨髓基质干细胞活性影响小的优点。
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