带有TAT—PTD跨膜转导域融合基因的原核表达及表达条件优化

• 作 者: 何火聪 刘树滔 潘剑茹 傅蓉 陈菁 陈躬瑞
• 机 构: 福建省肿瘤医院放射生物研究室,福州大学生物工程研究所
• 出 处: 福州大学学报：自然科学版
• 发表日期: 2010年4期
• 关键词: GST—TAT—GFP 大肠杆菌 融合基因 原核表达 优化 GST - TAT - GFP E coli fusion gene prokaryotic
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30800285/C100804）,福建省卫生教育联合攻关项目（WKJ2008-2-47-1）,福建省卫生厅青年科研资助项目（2007-1-20）

为构建pGEX—TAT—GFP原核表达质粒并优化GST—TAT—GFP表达条件，将PCR扩增的基因TAT—GFP克隆至质粒pGEX-2T，转化大肠杆菌B121，IPTG诱导表达并优化表达条件，表达产物进行SDS—PAGE、Western blot及荧光学特性鉴定．结果表明：构建的质粒经PCR、酶切和DNA测序正确，含有重组质粒的宿主菌经过IPTG诱导表达分子量约为54．3kD的融合蛋白GST—TAT—GFP，并经优化确定最佳的诱导表达条件．