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目的
观察高表达血小板衍生生长因子受体β(PDGFR–β)的内皮祖细胞(EPC)修复损伤血管的功能。
方法采用密度梯度离心法获取小鼠脾脏单个核细胞,使用含血管内皮细胞的专用培养基诱导脾源性EPC,使用基因转染的方法获取高表达PDGFR–β的EPC,并将其回输至脾切除后的颈动脉损伤模型中,以伊文思蓝染色评估血管再内皮化程度。
结果荧光双染鉴定显示培养的EPC阳性率在90%以上,荧光显微镜观察表明质粒转染效率为50%~60%,转染后EPC高表达PDGFR–β,伊文思蓝染色结果显示EPC尾静脉移植,有助于损伤后血管的再内皮化,PDGFR–β过表达EPC移植效果优于单纯EPC移植(P<0.01)。
结论体外培养脾源性EPC切实可行,使用基因转染的方法可以有效上调PDGFR–β表达,而过表达PDGFR–β的EPC显著促进小鼠颈动脉损伤早期血管再内皮化。