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目的
检测戊型肝炎病毒ORF3蛋白对人张氏肝细胞(Changliver,CCL13)增殖及细胞周期的影响。
方法将真核表达载体pDsRed-Monomer-N1-ORF3采用Lipofectamine™ 2000脂质体法转染CCL13细胞;用MTT比色法测定细胞增殖情况;用流式细胞仪碘化丙啶染色法检测细胞周期;并采用Western-Blot检测细胞周期蛋白的表达。
结果转染pDsRed-Monomer-N1-ORF3的CCL13细胞自第3天开始,增殖受抑(P<0.01);细胞周期阻滞于G0/G1期;细胞周期蛋白Cyclin Dl及Cyclin E1的表达受抑,Cyclin A2及Cyclin B1蛋白表达量与对照组无差异。
结论戊型肝炎病毒ORF3蛋白可通过抑制细胞周期蛋白Cyclin Dl及Cyclin E1的表达而抑制CCL13细胞的增殖。