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建立了周相萃取-高效液相色谱-串联质谱(HPLC—MS/MS)测定蜂蜜中泰妙菌素残留量的分析方法。样品用甲醇-偏磷酸水溶液提取,Oasis MCX SPE小柱净化,经C18色谱柱分离,以电喷雾离子源在正离子多反应监测(MRM)模式下进行测定,外标法定量。泰妙菌素的方法检出限为0.04μg/kg,定量下限为0.1μg/kg,在0.5~50μg/L范围内线性关系良好,相关系数r为0.9998。在0.1~5.0μg/kg加标水平内泰妙菌素的回收率为80%~94%,RSD为4.5%~8.1%。该方法实用、准确、灵