【摘 要】
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目的 通过对不同性别SD大鼠甲醇吸入染毒,探讨钙离子依赖性的半胱氨酸蛋白酶(calpain)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK5)、膜锚定蛋白(p35、p25)在甲醇诱导大鼠神经细胞凋亡中
【机 构】
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宁夏医科大学公共卫生学院,宁夏银川750004
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目的 通过对不同性别SD大鼠甲醇吸入染毒,探讨钙离子依赖性的半胱氨酸蛋白酶(calpain)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK5)、膜锚定蛋白(p35、p25)在甲醇诱导大鼠神经细胞凋亡中的相关作用机制.方法 将80只SFP级SD大鼠随机分为对照组及低、中、高剂量甲醇染毒组(剂量分别为25.34、50.69、101.38g/m3),每组20只,雌雄各半.吸入染毒28 d后,测定雌雄大鼠的体重增长情况,采用TUNEL试剂盒检测大鼠脑皮质神经细胞凋亡情况,采用q-PCR法及蛋白免疫印迹法分别检测不同性别、不同剂量组大鼠皮质中calpain、p35、p25、CDK5的mRNA及蛋白表达水平.结果 甲醇染毒组大鼠皮质神经细胞凋亡率与对照组相比明显升高,中、高剂量组大鼠神经细胞的凋亡率高于低剂量组,高剂量组高于中剂量组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),且随着甲醇剂量的增加,脑组织细胞凋亡越明显.对于雌性大鼠,甲醇高剂量组脑皮质p35/p25 mRNA高于对照组、低剂量组,高剂量组脑皮质calpain mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);对于雄性大鼠,甲醇高剂量组脑皮质p35/p25、calpain、CDK5 mRNA表达量高于对照组、低和中剂量组,差异有统计学意义(P＜0.05).相同性别间,高剂量组大鼠脑皮质中calpain、p35、CDK5蛋白表达水平明显高于对照组、低和中剂量组,中剂量组CDK5、p25蛋白表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).低、中剂量组雄性大鼠p35蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 甲醇暴露可导致雌雄大鼠大脑皮质中calpain、p25、p35、CDK5mRNA表达及蛋白表达水平异常,并诱导神经细胞凋亡.
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