论文部分内容阅读
目的 探讨程序性死亡受体-1 (PD-1)阻断对小鼠抗伯氏疟原虫ANKA(Plasmodium berghei ANKA,PbA)感染免疫应答的影响. 方法 将BALB/c小鼠按照随机数字表法分为健康组、感染组和PD-1组,每组8只.感染组和PD-1组小鼠经腹腔注射1×106个PbA感染红细胞,健康组小鼠不作任何处理.感染当天和感染后3、5、7d,PD-1组每鼠腹腔注射200 μg PD-1单抗,感染组注射等剂量PD-1同型对照单抗.感染后4d起隔天检测小鼠红细胞感染情况并记录小鼠生存情况.感染后5d每组各处死4只小鼠,取脾组织,制备脾细胞悬液,流式细胞术检测脾细胞中髓样树突状细胞(mDCs)及PD-1配体(PD-L1)的表达水平、骨髓来源抑制性细胞(MDSCs)和Th1细胞的百分率和绝对数,ELISA检测脾细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-6分泌水平. 结果 感染组小鼠在感染后5～6 d外周血开始出现疟原虫感染红细胞,随后红细胞感染率快速升高,在感染后16 d达到40％左右,PD-1组小鼠红细胞感染率与感染组的相比差异无统计学意义(P＞0.05).感染组小鼠在感染后15 d出现死亡,23 d全部死亡;PD-1组小鼠在13d出现死亡,18d全部死亡,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术检测结果显示,PD-1组脾细胞中CD11c+CD11b+ mDCs百分率为(2.21±0.10)％,明显低于感染组的(4.51±0.21)％(P＜0.05);PD-1组CD4+T-bet+IFN-γ+ Th1百分率为(3.38±0.54)％,低于对照组的(5.85±0.42)％(P＜0.05);mDCs上PD-L1的表达水平,PD-1组为(55.67±6.35)％,高于感染组的(21.35±4.45)％(P＜ 0.05);Gr-1+CD11b+MDSCs的百分率,PD-1组为(9.03±0.62)％,高于感染组的(3.58±0.16)％(P＜0.05).脾细胞培养上清中,感染组IFN-γ、IL-6和IL-10的分泌水平分别为(901.69±73.37)、(200.94±4.97)和(551.95±121.71) pg/ml,PD-1组分别为(231.17±57.69)、 (86.16±3.93)和(101.72±20.73) pg/ml,PD-1组均低于感染组(P＜0.05). 结论 PD-1阻断可削弱小鼠对PbA感染的保护性免疫应答.