【摘 要】
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目的 探讨Salubrinal对毒胡萝卜素内酯(Thapsigargin,Tg)诱导的人结肠癌系HT29细胞凋亡的保护作用及机制。方法 以HT29细胞为研究对象,分别给予不同浓度的Salubrinal(1μg/mL
【机 构】
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陕西省中医医院; 上海中医药大学脾胃病研究所; 上海中医药大学附属上海市中西医结合医院脾胃病科;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81873253);国家自然科学基金青年科学基金项目(81704009);陕西省中医医院院级基金项目(2018-04);上海市卫生和计划生育委员会科研项目(201640122)
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目的 探讨Salubrinal对毒胡萝卜素内酯(Thapsigargin,Tg)诱导的人结肠癌系HT29细胞凋亡的保护作用及机制。方法 以HT29细胞为研究对象,分别给予不同浓度的Salubrinal(1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL)预处理,30min后加入Tg(1μmol/L),继续培养24h后通过流式细胞和TUNEL检测方法对HT29细胞凋亡进行检测;Western Blot法检测凋亡蛋白Caspase-12的表达变化。结果 通过流式细胞仪测定,HT29细胞早期凋亡率为(9.67±1.03)%,经1μmol/L Tg诱导24h后HT29细胞凋亡率为(35.64±1.62)%,明显增加(P<0.05);与模型组比较,加用Salubrinal(1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL)干预后,随着剂量的增加,各组细胞凋亡率均明显降低(P<0.05);且Salubrinal(50μg/mL)细胞凋亡率明显低于Salubrinal(10μg/mL)。TUNEL检测正常空白组细胞凋亡率为(6.94±0.97)%,经1μmol/L Tg诱导24h后HT29细胞凋亡率为(34.56±1.45)%(P<0.05);与模型组比较,加用Salubrinal(1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL)干预后,各组细胞凋亡率均明显降低(P<0.05);且Salubrinal(50μg/mL)细胞凋亡率明显低于Salubrinal(10μg/mL)(P<0.05)。Western Blot检测结果表明,Caspase-12在正常空白组表达较低,HT29细胞经药物干预24后,在1μmol/LTg诱导模型组表达增高(P<0.05);通过不同浓度Salubrinal干预后,随着其浓度的增加凋亡蛋白Caspase-12表达逐渐降低(P<0.05)。结论 Salubrinal对毒胡萝卜素内酯诱导的人结肠癌系HT29细胞凋亡具有保护作用,作用机制可能与抑制内质网应激凋亡通路有关。
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