【摘 要】
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目的 探讨生物钟基因PER1对口腔鳞癌细胞（oral squamous cell carcinoma, OSCC）的增殖和凋亡及细胞内BAX、BCL2和PCNA表达昼夜节律的调控作用。方法 建立稳转过表达PER1的口腔鳞癌SCC15细胞（OE-PER1-SCC15）和不含PER1基因序列慢病毒感染的阴性对照SCC15细胞（NC-SCC15）;建立稳转沉默PER1的口腔鳞癌TSCCA细胞（RNAi-
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科
【基金项目】
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重庆英才·创新创业领军人才项目（cstc2022ycjh-bgzxm0064）； 重庆市自然科学基金一般项目（cstc2018jcyjAX0208）～～；
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目的 探讨生物钟基因PER1对口腔鳞癌细胞（oral squamous cell carcinoma, OSCC）的增殖和凋亡及细胞内BAX、BCL2和PCNA表达昼夜节律的调控作用。方法 建立稳转过表达PER1的口腔鳞癌SCC15细胞（OE-PER1-SCC15）和不含PER1基因序列慢病毒感染的阴性对照SCC15细胞（NC-SCC15）;建立稳转沉默PER1的口腔鳞癌TSCCA细胞（RNAi-PER1-TSCCA）和不含PER1片段的scramble质粒慢病毒感染的阴性对照TSCCA细胞（Scramble-TSCCA）。通过流式细胞术、RT-qPCR和Western blot检测各组细胞中细胞增殖指数、凋亡指数及细胞内PER1、BAX、BCL2和PCNA在24 h内6个不同时间点的表达。对数据进行方差分析和余弦分析，以中值、振幅和峰值相位为指标分析各基因表达的昼夜节律特征。结果 在OE-PER1-SCC15和NC-SCC15中，细胞增殖指数和凋亡指数及细胞内PER1、BAX、BCL2和PCNA mRNA和蛋白的表达具有昼夜节律性（P＜0.05）。与NC-SCC15细胞相比，OE-PER1-SCC15细胞凋亡指数、PER1和BAX mRNA和蛋白表达的中值显著升高，而细胞增殖指数、BCL2和PCNA mRNA和蛋白表达的中值显著降低（P＜0.05）;细胞凋亡指数和BAX mRNA表达的振幅显著升高，而BCL2和PCNA mRNA表达的振幅显著降低（P＜0.05）;细胞凋亡指数、PER1和BAX mRNA和蛋白表达的峰值相位前移，而细胞增殖指数、BCL2和PCNA mRNA和蛋白表达的峰值相位后移。与Scramble-TSCCA细胞相比，RNAi-PER1-TSCCA细胞中BAX蛋白的表达发生昼夜节律紊乱，但细胞增殖指数、凋亡指数及细胞内PER1、BCL2和PCNA mRNA和蛋白以及BAX mRNA的表达具有昼夜节律（P＜0.05）,其昼夜节律特征与OE-PER1-SCC15细胞相反。结论 PER1表达改变后导致其自身的昼夜节律特征发生改变，同时调控口腔鳞癌细胞增殖和凋亡及BAX、BCL2和PCNA表达的昼夜节律特征发生改变。
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