【摘 要】
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目的建立定量检测人血清可溶性补体受体1型(sCR1)双抗体ELISA夹心法。方法用鼠抗人CD35单克隆抗体(mAb)包被反应板,以兔抗人sCR1抗体(PcAb)为夹心抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标
【机 构】
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解放军第153中心医院全军创伤骨科中心; 解放军第153中心医院心肾内科; 新乡医学院; 解放军第153中心医院济南军区检验中心;
【基金项目】
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河南省重点科技攻关项目(102102310161);济南军区重点课题资助项目(02Z27)
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目的建立定量检测人血清可溶性补体受体1型(sCR1)双抗体ELISA夹心法。方法用鼠抗人CD35单克隆抗体(mAb)包被反应板,以兔抗人sCR1抗体(PcAb)为夹心抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG为检测抗体,纯化后的人sCR1蛋白为标准品,建立定量检测人血清sCR1双抗体夹心ELISA法,并检测50例体检健康者和32例肝硬化患者血清样本中sCR1水平。结果建立的双抗体夹心ELISA法检测人血清sCR1的线性范围为15.6～250 ng/mL。低、高浓度批内变异系数(CV)分别为9.3%、7.1%;批间CV分别为11.2%和9.82%;回收率分别为89.5%和92.5%。50例健康人和32例肝硬化患者血清sCR1水平分别为(33.82±5.88)ng/mL和(152.99±9.51)ng/mL,两者比较有统计学差异(t=70.18,P<0.001)。结论成功建立了检测人血清sCR1的双抗体夹心ELISA法,重复性和准确性较好。初步发现肝硬化患者血清sCR1水平显著升高。
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