弓形虫表面抗原1、棒状体蛋白18真核表达载体的构建与体外表达

• 作 者: 吴腊梅 吴婷 吴亮 王晓 苏丹华 刘原 陶思佳 魏逸青 姜旭
• 机 构: 江苏大学医学院,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
• 出 处: 江苏大学学报：医学版
• 发表日期: 2015年3期
• 关键词: 刚地弓形虫 SAG1 ROP18 真核表达质粒 Toxoplasma gondii SAG1 ROP18 eukaryotic expression pl
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目(81301453),卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室开放课题(WSBKTKT201302),中国博士后科学基金资助项目(2014M561598),江苏省博士后科研资助计划项目(1402171C),江苏大学高级人才启动基金资助项目(13JDG023,13JDG127)

目的:构建刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)表面抗原1(surface antigen 1,SAG1)及棒状体蛋白18(rhoptry protein 18,ROP18)的真核表达重组质粒,并在真核细胞中表达目的蛋白。方法:设计SAG1、ROP18的特异引物,采用RCR技术从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码SAG1、ROP18基因片段,经克隆至p TG19-T载体后,亚克隆至真核表达载体p3×FLAG-Myc-CMVTM-24,构建真核表达重组质粒p3×FLAG-Myc