【摘 要】
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目的 建立一种基于表面等离子体共振传感器技术检测人类甲型流感病毒的方法,并进行初步诊断应用.方法 分别设计基于甲型流感M基因的引物和探针,制备RT-PCR扩增产物,优化并确
【机 构】
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中山大学公共卫生学院,广东,广州,510080;深圳国际旅行卫生保健中心
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目的 建立一种基于表面等离子体共振传感器技术检测人类甲型流感病毒的方法,并进行初步诊断应用.方法 分别设计基于甲型流感M基因的引物和探针,制备RT-PCR扩增产物,优化并确定基于传感技术的实验条件,建立高灵敏度和高特异度的表面等离子体共振传感器方法.结果 缓冲液的盐离子强度和pH值是影响杂交效果的关键因素,对其优化后标准曲线参数良好,甲型流感病毒标准品的Ru值与其相应梯度稀释标准品浓度呈良好的线性关系(R2>0.99),同时,该传感器在200mmol/L氯化钠的磷酸盐缓冲液中可以有效区分DNA的完全匹配与单碱基错配,以乙型流感探针作为质控,该探针并不与甲型流感扩增产物发生特异性杂交.结论 成功建立了高灵敏度和高特异度的甲型流感病毒表面等离子体共振传感器检测方法,为临床诊断或感染病例提供了技术平台.
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