【摘 要】
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参考GenBank(EU015066)盖他病毒(Getah virus,GETV) SH05-6中结构蛋白E2的全基因序列并对其进行密码子优化.将优化后的基因片段克隆至原核表达载体pCold Ⅰ中,构建重组表达载
【机 构】
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湖南农业大学动物医学院,中国农业科学院上海兽医研究所,湖南省畜牧兽医研究所
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参考GenBank(EU015066)盖他病毒(Getah virus,GETV) SH05-6中结构蛋白E2的全基因序列并对其进行密码子优化.将优化后的基因片段克隆至原核表达载体pCold Ⅰ中,构建重组表达载体pCold-E2.重组质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG低温诱导后,SDS-PAGE和Western blot进行分析.结果显示,在相对分子质量46 kDa处出现目的条带,与预期相符,且占大肠杆菌表达蛋白总量的80％.结果证明E2基因在大肠杆菌中获得了高效表达,并且能与抗血清发生特异性反应.本研究为GETV快速检测方法的建立和GETV流行病学调查奠定了基础.
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