间日疟原虫荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

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目的建立间日疟原虫荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测方法,为快速、准确定量检测间日疟原虫奠定基础.方法根据间日疟原虫SSURNA基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针,将PCR扩增的间日疟原虫SSURNA基因片段克隆入载体,对重组质粒进行筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的判定和样品检测.结果应用重组质粒制作的定量曲线,循环阈值与模板浓度具有良好的线形关系,127份疟区血样和30份正常血样的检测,显示此法有较高的灵敏度和特异度,定量检测结果与镜检感染率呈直线相关,相关系数为0.959.结论建立了间日疟原虫的荧光定量PCR检测方法.
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