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[目的]观察灭幽汤对幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)相关性胃炎脾胃湿热证模型小鼠TLR4、NF-κB65的蛋白及mRNA、TNF-α、IL-8表达的影响,探讨灭幽汤治疗Hp相关性胃炎脾胃湿热证的机制。[方法]将70只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、高浓度灭幽汤组(高灭组)、低浓度灭幽汤组(低灭组)、胃三联组(替硝唑+克拉霉素+枸橼酸铋钾颗粒),每组14只;采用复合因素(肥甘食物+湿热环境+幽门螺杆菌)建立BALB/c小鼠Hp相关性胃炎脾胃湿热证模型;造模成功后连续给药14d,而后分别采用免疫组化检测TLR4、NF-κB65蛋白,qPCR检测TLR4mRNA、NF-κB65mRNA的表达情况,采用ELISA检测血清TNF-α、IL-8的表达。[结果]模型组TLR4、NF-κB65的蛋白及mRNA、血清TNF-α、IL-8含量表达均高于对照组,差异有统计学意义;通过药物治疗后,低灭组、高灭组、胃三联组TLR4、NF-κB65的蛋白及mRNA、血清TNF-α、IL-8含量表达均低于模型组,差异有统计学意义;高灭组TLR4、NF-κB65的蛋白及mRNA、血清TNF-α、IL-8含量表达虽低于胃三联组,但差异无统计学意义。[结论]灭幽汤可能通过干预TLR4/NF-κB65信号通路,抑制TLR4、NF-κB65及下游因子的表达以达到治疗Hp相关性胃炎脾胃湿热证的目的。