【摘 要】
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目的构建淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC表达质粒,探讨淋病奈瑟菌耐药的检测和耐药机制.方法从淋病奈瑟菌标准株中扩增淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC基因片段.酶切后插入pET-28a(+),构建重组表
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目的构建淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC表达质粒,探讨淋病奈瑟菌耐药的检测和耐药机制.方法从淋病奈瑟菌标准株中扩增淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC基因片段.酶切后插入pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-mtrC.通过质粒双酶切和DNA测序证实该重组质粒构建正确.重组质粒转化人大肠杆菌DE3中,经IPTG诱导表达蛋白.结果经酶切鉴定和测序分析,质粒构建正确,核苷酸序列与GeneBank(U14993)公布的序列相比较,同源性达到99.5%.通过IPFG诱导,SDS-PAGE可检测到约48 500大小的融合蛋白;与预测分子量相同.结论淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC原核表达质粒构建和表达成功,为研究其mtr外排系统的耐药机制打下基础.
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