【摘 要】
：
目的构建HIV-1 B'亚型中国流行株gag和env融合基因的DNA疫苗,对其免疫原性进行研究.方法根据已报道的HIV-1 B'亚型RL42分离株gag和env基因的氨基酸序列按哺乳动物密码子使用
论文部分内容阅读
目的构建HIV-1 B'亚型中国流行株gag和env融合基因的DNA疫苗,对其免疫原性进行研究.方法根据已报道的HIV-1 B'亚型RL42分离株gag和env基因的氨基酸序列按哺乳动物密码子使用频率进行优化并人工合成基因,插入真核表达载体pDRVISV1.0中,构建表达RLA2 gag-env融合蛋白的DNA疫苗,pSVRL/GE.用Western blot和抗gag p55抗体细胞内染色的方法体外检测pSVRL/GE的表达效率.DNA疫苗pSVRL/GE免疫BALB/c小鼠后,用ELISPOT检测小鼠的细胞免疫反应.结果限制性内切酶鉴定表明融合基因已成功插入pDRVISV1.0载体中,Western blot证实融合基因可有效表达融合蛋白;细胞内染色结果表明,pSVRL/GE转染的293T细胞中49.8%表达gag p55,荧光强度均值为924;而空载体pDRVISV1.0转染的293T细胞中非特异背景染色只有0.5%.经免疫的小鼠脾细胞体外用H-2d限制性表位肽AMQMLKET刺激后,ELISPOT检测显示,pSVRL/GE免疫小鼠每106脾细胞形成226个斑点(SD=140),而空载对照组每106脾细胞形成29个斑点(SD=16)(P＜0.05).结论所构建的DNA疫苗pSVRL/GE可高效表达相应抗原蛋白,并可有效激活机体的细胞免疫反应.
其他文献
通过盆栽试验,对"秦油8号"(Brassica rlapus L."Qinyou No.8")在不同水平Cd污染下的耐性以及富集指标进行测定,并施加不同水平螯合剂对油菜的修复效果进行强化.结果表明,低水
甲烷启动时间缩短1/3,甲烷总产量亦有大幅提高.形态、生理生化特征以及16S rDNA序列分析表明,该菌为嗜树木甲烷短杆菌(Methanobrevibacter arboriphilus).图8参16
目的研究浙江省近2年新分离的甲3型流行性感冒(流感)病毒株血凝素HA1基因特性,以了解浙江省流感病毒变异情况和WHO推荐疫苗株对人体的保护情况。方法采集浙江省近2年类流感病
β2微球蛋白(β2m)是主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ类分子的轻链部分,该蛋白的原核表达与纯化是制备MHC-Ⅰ类分子的首要条件.利用已经构建好的β2m原核表达载体pET23a+β2m,
目的:探索应用引物原位标记技术分析精子染色体非整倍性的可靠性.方法:采用3 mol/LNaOH溶液对精子标本进行快速而有效的预处理,此步骤能够对精子细胞核同时进行去浓缩和变性,
针对工业区急救点布局存在的问题,综合考虑多种影响因素,建立多目标多约束数学模型.将成本、急救时间和急救点数量作为3个优化目标,并根据实际情况构建相应的约束条件.运用NS
目的利用RNAi技术研究PPARα基因表达对骨骼肌脂代谢相关基因的表达的影响.方法设计合成针对过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体α(PPARα)的dsRNA并将其转染到鼠骨骼肌C2C12细
[目的]构建适合真菌ATMT转化的GFP基因表达载体.[方法]利用含有GFP基因和Nos终止子的A2GFP质粒和含有普遍适于真菌基因表达的构巢曲霉启动子(Ptrpc)的pUCATPH质粒,通过重组PC
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
应用速度-浓度双分布格子 Boltzmann模型建立了基于LBM的瓦斯蔓延速度模型和浓度模型,并通过Boussinesq方程将2个模型有机耦合起来。采用基于分块耦合算法的速度-浓度LBM模型