伪狂犬病病毒Fa株gE基因在大肠杆菌中的表达及gE—ELISA鉴别诊断方法的建立

• 作 者: 阳爱国 郭万柱 赵银丽 徐志文 王小玉
• 机 构: 四川农业大学动物生物技术中心,四川省动物防疫监督总站
• 出 处: 中国兽医学报
• 发表日期: 2007年3期
• 关键词: 伪狂犬病病毒 GE基因 gE—ELISA PRV Fa strain gE gene gE-ELISA
• 基金项目: 国家“863”计划资助项目（2002AA241341）,国家“十五”科技攻关项目（2002BA514A一16-7）

试验以pPGEDNA为模板，用1对分别含有EcoR I和BamH I酶切位点的伪狂犬病病毒gE基因特异性引物，扩增出约1．7kb的含完整gE基因的DNA片段；目的片段经EcoR I和BamH I双酶切后，插入原核表达载体pBV220得到重组表达质粒pBVgE，并转化大肠杆菌DH5a；对温敏诱导表达所获产物进行SDS—PAGE、Western—Blot和琼脂双扩散检测。结果表明，gE糖蛋白得到了高效表达，表达产物约占总蛋白的17％。为了鉴别伪狂犬病疫苗免疫猪和自然感染猪，用表达纯化的gE蛋白为抗原，建立了G