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目的：以金钗石斛为材料，建立石斛的RAPD优化条件，应用于石斛相似种的DNA多态性分析。方法：分别设置模板DNA，Mg^2＋，Taq DNA聚合酶，dNTPs，引物的浓度梯度，优化RAPD反应体系。结果：在25μl总反应体系中，以上反应物的用量分别为100ng，3．0mmoL／L，1．0U，0．2mmoL／L，0．4μmol／L时所获得的石斛属DNA指纹图谱谱带型清晰、重复性好。其中用S48扩增的DNA指纹图谱具有更大的相似性，适合于石斛真伪鉴别；而S90扩增的片段具有明显的多态性，适合于石斛遗传分化研究