【摘 要】
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目的 观察益肝明目汤对糖尿病视网膜水肿模型大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1（cysteine aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1）信号通路的影响，从细胞焦亡的角度探讨其治疗
【基金项目】
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湖南省中医药科研计划课题项目（201917）;湖南省中医药科研计划项目（C2022003,E2022044）； 湖南省自然科学基金面上项目（2021JJ30520）； 长沙市自然科学基金项目（kq2014226）； 湖南省教育厅科学研究项目（19A362）；
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目的 观察益肝明目汤对糖尿病视网膜水肿模型大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1（cysteine aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1）信号通路的影响，从细胞焦亡的角度探讨其治疗糖尿病视网膜水肿的作用机制。方法 将36只SD大鼠随机分为空白组（6只）和造模组（30只）。采用一次性腹腔注射40 mg/kg链脲佐菌素（streptozocin, STZ）溶液联合高糖高脂饲料喂养建立糖尿病视网膜水肿大鼠模型。将成模大鼠随机分为模型组，安多明组，低、中、高剂量组，每组6只，分别予以蒸馏水、羟苯磺酸钙胶囊（0.09 g/kg）、益肝明目汤（2.8、5.6、11.2 g/kg）进行灌胃，每日2次，连续4周。观察大鼠一般生物学特征，监测不同时期血糖、体质量变化；采用眼底荧光血管造影（fundus fluorescence angiography, FFA）和光学相关断层扫描技术（optical correlation tomography, OCT）观测各阶段视网膜血管渗漏及视网膜厚度的变化；HE染色检测视网膜组织病理变化；免疫组化法检测视网膜组织NLRP3与衔接蛋白（apoptosis-associated speck-like protein, ASC）表达水平；Western blot检测视网膜组织Caspase-1与NLRP3表达水平；ELISA检测血清炎症因子白细胞介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）和白细胞介素-18（interleukin-18, IL-18）含量。结果 与空白组比较，模型组大鼠一般生物学特征出现较明显的改变；血糖显著升高（P＜0.01）；体质量显著降低（P＜0.01）；视网膜厚度增加（P＜0.01）;FFA可见视网膜血管走行迂曲，散在微血管瘤及少许点状强荧光；病理形态见各层细胞排列紊乱、稀疏，内丛状层、内外核层松散，结构紊乱，视网膜厚度增加；视网膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达及炎症因子IL-1β、IL-18含量显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，中剂量组、高剂量组大鼠血糖均降低（P＜0.05）；安多明组、低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠体质量均升高（P＜0.01）；各给药组大鼠视网膜厚度呈不同程度减少（P＜0.01）;FFA见微血管瘤及点状强荧光减少；病理形态见视网膜各层结构基本完整，排列规整，厚度减少；视网膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达及炎症因子IL-1β、IL-18含量显著降低（P＜0.01,P＜0.05）。结论 以疏肝健脾、活血利水为治法的益肝明目汤可能通过干预NLRP3/Caspase-1介导的细胞焦亡，进而减轻炎症因子的释放，减轻视网膜水肿，从而改善视网膜功能。
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