【摘 要】
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目的 研究Reversine对肝星状细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响,进一步探讨Reversine防治肝纤维化的机制.方法 体外培养HSCs细胞,分别给予不同浓度Reversine(5、10、20、40
【机 构】
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广州医科大学附属广州市第一人民医院 广东广州510180;广州消化疾病中心 广东广州510180;华南理工大学第二附属医院 广东广州510180
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目的 研究Reversine对肝星状细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响,进一步探讨Reversine防治肝纤维化的机制.方法 体外培养HSCs细胞,分别给予不同浓度Reversine(5、10、20、40 μg/mL)处理24 h后,采用CCK-8法检测Reversine对HSCs细胞增殖抑制率;流式细胞术检测Reversine对HSCs凋亡的影响;细胞免疫荧光法检测TGF-β1、caspase-3、Aurora B、SMAD2/3、Desmin、p16INK4a、SMP-30、p66SHC等蛋白的表达情况.结果 不同浓度Reversine(5、10、20、40μg/mL)明显抑制HSCs的增殖(38.03±9.05、44.97±5.85、55.33±2.40、64.19±3.66,F=27.356,P=0.000),且促进HSCs凋亡(13.14±1.87、15.85±1.00、20.57±0.90、21.24±1.07,F=298.75,P =0.000).荧光显微镜显示Reversine作用HSCs后出现典型的细胞凋亡形态学改变,细胞体积变小,细胞质浓缩,细胞核固缩、碎裂,出现多倍体等,荧光定性检测发现TGF-β1、caspase-3、Aurora B、SMAD2/3等蛋白有表达,Desmin、p16INK4a、SMP-30、p66SHC等蛋白未见表达.结论 Reversine能抑制肝星状细胞的增殖,诱导其凋亡,并且影响肝星状细胞TGF-β1、caspase-3、Aurora B、SMAD2/3等蛋白质的表达.
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