【摘 要】
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目的利用杆状病毒系统表达戊型肝炎病毒HEV ORF3,为进一步研究免疫学性质与功能提供基础.方法通过RT-PCR方法获得HEVORF3基因的目的基因片段,插入中间转染载体质粒pVL1393,
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所分子生物室昆明650118
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目的利用杆状病毒系统表达戊型肝炎病毒HEV ORF3,为进一步研究免疫学性质与功能提供基础.方法通过RT-PCR方法获得HEVORF3基因的目的基因片段,插入中间转染载体质粒pVL1393,构建重组质粒,再与杆状病毒线性DNABaculoGoldTM 共转染Sf9昆虫细胞,通过同源重组得到重组杆状病毒.以此重组杆状病毒感染昆虫细胞后,对表达的重组蛋白进行免疫学检测并免疫小鼠.结果表达的重组蛋白约占昆虫细胞总蛋白的2%,可被戊型肝炎患者与实验猴阳性抗血清有效识别,并能诱导小鼠产生对HEV特异性免疫应答.
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