【摘 要】
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目的:探讨转甲状腺素(TTR)蛋白代谢修饰与淀粉样变形成的分子机制.方法:本研究首先利用ProteomeLabPF-2D系统依据蛋白质等电点分选各个pH值范围蛋白质,然后利用抗人TTR抗体,
【机 构】
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天津医科大学医学检验学院临床检验和血液教研室,天津,300203
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目的:探讨转甲状腺素(TTR)蛋白代谢修饰与淀粉样变形成的分子机制.方法:本研究首先利用ProteomeLabPF-2D系统依据蛋白质等电点分选各个pH值范围蛋白质,然后利用抗人TTR抗体,点免疫印迹实现鉴定TTR蛋白存在于被收集的范围.利用硫黄素T(ThT)试剂,测定各个收集部分溶液中淀粉样变的含量,进一步利用飞行质谱的表面增强激光解吸/电离时间(SELDI-TOF-MS)分析各个部分TTR蛋白的修饰类型.结果:系统性老年性淀粉样变(SSA)患者和健康志愿者血清pH范围分别为8.1～8.0,4.0～4.6及6.8～5.8范围时出现高丰度蛋白.并且SSA患者pH6.8～5.8范围淀粉样变含量明显高于对照组(P＜0.05),其中SSA组与健康组相比,血TTR蛋白N端氨基酸修饰基团包括磷酰基(Phosphoryl)、羟基(Hydroxyl)、葡萄糖胺(O-GlcNac)基团修饰阴性.结论:SSA患者血TTR蛋白N端氨基酸修饰基团Phosphoryl、Hydroxyl、O-GlcNac的减少可能与淀粉样蛋白的形成有关.
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