检测Asia I型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析法的建立及应用

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目的:建立一种快速、简便的检测Asia I型口蹄疫病毒(FMDV)的胶体金免疫层析法(GICA).方法:采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,用其标记纯化的Asia I型口蹄疫抗体后包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的Asia I型口蹄疫抗体和纯化的羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带.玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜按顺序组装成胶体金快速诊断试纸条,通过系列实验验证其灵敏度、特异性、重复性及稳定性.结果:研制的Asia I型口蹄疫快速检测试纸条对Asia I型口蹄疫病毒的检测灵敏度为0.116 mg/L,对阳性样品进行重复性试验3次检测结果完全相同.交叉反应证实该方法与其他血清型口蹄疫抗原和猪水疱病抗原(SVD)无交叉反应.检测田间样品,GICA与反向间接血凝的定型的符合率为96.87%.稳定性实验证实试纸条可保存12个月.结论:建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值.
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